步骤1. 目标基因全基因合成
步骤2. 目标基因亚克隆
步骤1，2详细情况可参考 基因获取及蛋白表达载体设计、构建服务
步骤3. P. Pichia表达菌株电转化：
 酶切线性化表达质粒
 将表达质粒通过电转化到高效的P. Pichia表达菌株中
 通过PCR鉴定至少挑选5个阳性克隆
 可提供表达菌株：X33，GS115，KM71和SMD1168
提供客户：PCR阳性克隆及PCR结果报告。
时间：1周
步骤4. P. Pichia表达菌株筛选：
 将5个阳性克隆于BMGY培养基中扩增，然后换至BMMY培养基中，并加入甲醇诱导表达目标蛋白。
 SDS-PAGE电泳检测培养上清中目标蛋白的表达情况，并挑选合适的单克隆菌株用于目标蛋白的表达。
 如果培养上清中检测不到表达，则通过将上清浓缩20倍作用再检测，或通过Western-blot方法检测目标蛋白表达（客户需要提供相关抗体）
提供客户：任意一个客户需要的阳性克隆菌株及表达筛选结果报告。
时间：2周
步骤5. P. Pichia表达菌株表达优化：
 挑选20个阳性克隆进行常规表达筛选，并对其中表达最好菌株优化表达条件。
 对挑选出来的单克隆菌株，优化培养及诱导条件（培养基，菌体密度，甲醇浓度，诱导时间等），提高目标蛋白的表达量。
提供客户：任意三个客户需要的阳性克隆菌株及优化表达条件结果报告。
时间：2周
步骤6. 目标蛋白表达及纯化：
 摇瓶培养1L重组酵母菌，诱导表达目标蛋白。
 通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。
 通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。
 通过Western-blot验证目标蛋白正确性。
提供客户：纯化好的目标蛋白1~10mg及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签（Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达90以上。

时间：2~3周
步骤7. 目标蛋白的再加工及详细检测
 对生物学活性要求较高的纯化后蛋白产品进行复性研究。
 内毒素去除，除菌，冻干等进一步加工。
 通过HPLC，质谱等方法详细检测目标蛋白的质量。
提供客户：加工后的终产品及相关实验和检测报告。
时间：1~2周
步骤8. 大规模制备
提供客户：合格的目标蛋白及服务报告。
时间：协商 ,