miRNA（microRNA）是一类长度约为17-25nt的内源性非编码RNA，广泛参与基因转录后调控活动，其中多数miRNA具有高度序列保守性、表达时序性和组织特异性。最近的研究表明，miRNA参与了各种各样的调节途径，包括细胞增殖与凋亡、生长发育、器官形成、造血过程、脂肪代谢、病毒防御等各种功能，具有重要的基因表达调控作用。

一、Agilent miRNA芯片及技术服务 

      作为miRNA芯片的后起之秀，Agilent miRNA芯片自上市之初就受到业界广泛关注，上市来，其优异的性能指标更是获得科研工作者的广泛认可。

Agilent miRNA 芯片技术可以从容应对以上挑战  

1、特殊的探针设计，保证只识别成熟miRNA，
     专利独享; 
2、高度灵敏，可识别一个碱基差异，检测下限
     <0.1 amol
3、样品需求量低，只需要100ng 总RNA
4、不需要分离miRNA，避免丢失及引起误差
5、宽的动态检测范围，检测丰度跨5个log，有
     利于检测到更宽丰度范围的miRNA
6、高重复探针，每个miRNA至少重复20次

7、良好的实验表现，平均CV<10%，R2﹥0.99

二、Affymetrix miRNA芯片检测

简介

　　Affymetrix公司于2011年2月底推出了miRNA芯片的升级版本GeneChip miRNA 2.0，这款芯片不仅完全覆盖Sanger miRBase 15.0版本131个物种的所有miRNA成熟体，还包括人的2，334个snoRNA和scaRNA，并针对人、大鼠、小鼠的miRNA前体设计了2,202个探针组。前代miRNA芯片产品将于2011年9月30日停止供应。该芯片仅需约3-5 μg的total RNA就可以出色的完成实验，同时保证了卓越的特异性，是研究miRNA全面而准确的芯片工具。

检测原理

　　Affymetrix miRNA芯片检测，采用FlashTag Biotin RNA Labeling Kit进行样品标记过程，具有快速，精确，灵敏度高，重复性好的特点。RNA样品采用Poly(A) RNA聚合酶加尾，利用RNA连接酶将带有生物素标记的信号分子与之连接，连接产物和芯片进行杂交反应。可标记多种RNA样品：如total RNA；降解的RNA；低分子量RNA (LMW RNA)。整个标记过程可以在一个小时内完成。标记过程如下所示：

　　该方法高灵敏度主要归因于Genisphere的3DNA多聚体信号放大技术，该多聚体是由多条DNA交联并结合有生物素的带有许多分枝的生物大分子，每个3DNA分子结合有大约15个生物素，而普通标记物通常只结合一个生物素分子。

技术优势

全面：Affymetrix GeneChip miRNA 2.0一张芯片上覆盖131个物种的miRNA，还包括人的2,334个snoRNA和scaRNA，并针对人、大鼠、小鼠的miRNA前体设计了2,202个探针组进行全面检测；

灵敏：采用专利FlashTag Biotin RNA Labeling Kits，Total RNA最低起始量最低可至100ng(要求纯化后的total RNA达到1μg)；检测线性范围大于1000；对85%的miRNA检测可检测到的1 attomoles；

准确：芯片重复性好，片间和片内相关系数大于0.95；无需进行miRNA扩增，克服了研究miRNA的困难；

质控完善：Affymetrix专业的探针设计和质控，保证杂交特异性。