步骤1. 目标基因全基因合成
步骤2. 目标基因亚克隆
步骤1，2详细情况可参考 基因获取及蛋白表达载体设计、构建服务
步骤3. E. coli表达菌株转化及筛选：
 扩增并抽提构建好的表达质粒。
 将表达质粒转化到高效的E. coli表达菌株中。
 至少挑选5个阳性克隆于LB培养基中扩增并诱导表达目标蛋白。
 SDS-PAGE电泳检测培养后中目标蛋白的表达情况，并挑选合适的单克隆菌株用于目标蛋白的表达。
 可提供表达菌株：DH5α, Top10, JM115, BL21 (DE3), BL21 (DE3) pLys, XL1 Blue, XL10 Golden, Rosetta-gami。
提供客户：重组质粒的表达菌株及表达检测报告。
时间：1周
步骤4. 目标蛋白表达及纯化：
 摇瓶培养1L重组细菌，诱导表达目标蛋白。
 通过亲和，离子交换，疏水及凝胶过滤等多种层析方法纯化表达的重组蛋白。
 利用蛋白酶去除不需要的纯化标签（Tag），再纯化获得所需的目标蛋白（可选，构建表达载体时需加入合适的蛋白酶切位点）。
 通过SDS-PAGE电泳检测每步结果并控制最终产品质量。
 通过Western-blot验证目标蛋白正确性。
提供客户：纯化好的目标蛋白5~10mg及纯化报告。可按客户要求提供含纯化标签（Tag）或切除纯化标签（Tag）的最终蛋白，纯度最高可达95以上。

时间：2~3周
步骤5. 目标蛋白的再加工及详细检测
 对生物学活性要求较高的纯化后蛋白产品进行复性研究。
 内毒素去除，除菌，冻干等进一步加工。
 通过HPLC，质谱等方法详细检测目标蛋白的质量。
提供客户：加工后的终产品及相关实验和检测报告。
时间：1~2周
步骤6. 大规模制备
提供客户：合格的目标蛋白及服务报告。
时间：协商 ,,