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上海日初生物科技有限公司
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8.1                FQ-PCR 简介:

荧光定量PCR不同于其他PCR是在于在PCR过程中利用荧光染料在光激发下释放的荧光能量的变化直接反映出PCR扩增产物量的变化。荧光信号变量与扩增产物变量成正比。PCR扩增产物越多,荧光信号越强。荧光染料直接结合扩增产物 如SYBB Green I,类似于EB,能特异性地区分单双链DNA,只与双链DNA结合.

 

Threshold(阈值):PCR扩增信号进入相对稳定对数增长的最下限,通常设定在S型扩增曲线的增长拐点附近。

 

Cycle Threshold (Ct值):PCR增长信号与Threshold发生交汇的循环数,也是FQ-PCR判断阴阳性和进行定量分析的依据。 CT值越小,说明起始模板量越大,原始样品中待检测基因含量越高。通过比较CT值的大小,即可比较各检测基因的相对含量。

8.2                FQ-PCR实验流程:

 

核心:首先确定PCR方法,而后确认靶序列,引物,探针序列。

关键步骤:RNA抽提,逆转录

 

8.3            收费标准和实验周期

PCR方法

样品数量

收费标准

实验周期

 

SYBR Green

染料法

1-20个

200RMB/样品/指标

3工作周

20-50个

150RMB/样品/指标

4工作周

50个以上

120RMB/样品/指标

5工作周

 

Taqman

 

探针

1-20个

200RMB/样品/指标

3工作周

20-50个

150RMB/样品/指标

4工作周

50个以上

120RMB/样品/指标

5工作周

 

Taqman

MGB

探针

1-20个

200RMB/样品/指标

3工作周

20-50个

150RMB/样品/指标

4工作周

50个以上

120RMB/样品/指标

5工作周

 

FQ-PCR扩增曲线示例: